1985年，李幼斌進(jìn)入長春電影制片廠，并主演電影《死證》，27歲的他扮演一位40多歲的東北抗日聯(lián)軍的師長。1987年，李幼斌在電影《天谷》中擔(dān)任男主角。1988年，李幼斌在自己的第一部電視劇《她曾經(jīng)是我的妻漏享店子》中扮演主角。1994年，在電視劇《潮起潮落》中扮演主角魯明寬。1999年參演電影《橫空出世》，在其中扮演陸光達(dá)。

2000年，李幼斌在《非常代價》中扮演馬超。參演電影《橫空出世》。2004年在電影《驚濤駭浪》中扮演張子明，獲得第9屆華表百花最佳男演員獎提名。2005年在電視劇《亮劍》中扮演李云龍，和童蕾、何政軍、張光北等人合作。獲得第23屆中國電視金鷹獎觀眾喜愛的男演員獎 。

2006年，李幼斌主演《闖關(guān)東》，和薩日娜、劉向京、朱亞文等人合作。2007年，在電視劇《仁者無敵》中扮演皮德貴。2009年，根據(jù)紅色經(jīng)典巨著《紅日》改編的同名電視劇開播，李幼斌在劇中參與演出國民黨高級將領(lǐng)張靈甫。

2010年，李幼斌在諜戰(zhàn)劇《旗袍》中扮演錢鵬飛，和馬蘇、王志文合作。同一年在夏雨主演的電視劇《師傅》中扮演老鐵。仔盼府2011年，在《國門英雄》中扮演關(guān)漢生，和史蘭芽、張志堅(jiān)、田子田合作。2012年，參演《老嚴(yán)有女不愁嫁》，飾旋戰(zhàn)雅演的是愛女如命，對未來女婿挑剔萬分的倔強(qiáng)岳父。2013年，主演電影《雷鋒的微笑》，和萬思維、唐國強(qiáng)等人合作。同一年在《愛的保鏢》中扮演孫海山。10月份，主演懸疑劇《別讓我看見》，扮演老刑警劉玉生。2014年5月份，在家庭輕喜劇《孫老倔的幸福》中，扮演孫老倔。9月份，主演諜戰(zhàn)劇《郵差》。2015年3月份，在《決戰(zhàn)江橋》扮演抗戰(zhàn)英雄馬占山將軍。2017年11月份，主演主旋律電影《中國企業(yè)家》。

2019年6月26日，李幼斌李幼斌、史蘭芽夫妻第一次共同參與演出話劇《老式喜劇》在北京人藝實(shí)驗(yàn)劇場首演；同一年9月份，特別參與演出的戰(zhàn)爭電影《九條命》發(fā)布了首支先導(dǎo)預(yù)告片；10月16日，和張明健、李君峰、吳其江等合作主演的抗戰(zhàn)劇《一馬三司令》首播。

2020年9月30日，李幼斌參加2020央視國慶晚會《“中國夢·祖國頌”——2020國慶特別節(jié)目》，講述《從長江畔到黃鶴樓》；11月13日，特約參與演出的川軍抗戰(zhàn)電影《九條命》上映。11月16日與陳星旭、胡冰卿、王學(xué)圻主演的當(dāng)代工業(yè)青春勵志劇《最好的時代》播出。2021年5月14日，李幼斌特別參與演出電視劇《王牌部隊(duì)》發(fā)布傳承版海報(bào)。

李幼斌人物評價

李幼斌賦予了人物一種迷人的氣質(zhì)，給大多數(shù)觀眾留下了深刻印象。（陳健評）

李幼斌塑造過眾多英雄形象，被認(rèn)為是“大器晚成”的演技派演員的代表。深沉、犀利、有城府，長期舞臺演出的經(jīng)驗(yàn)積累使他擅長對角色的內(nèi)心體驗(yàn)，塑造的角色有血有肉，特別是反面人物不臉譜化，真實(shí)可信。（深圳晚報(bào) 評）